平面光顯微鏡

平面照射顯微鏡就是用超薄光從樣品側面照射，激發(fā)了樣品的一個二維斷層面。發(fā)射的熒光從樣品的上面或下面成像，探測器放置在垂直于照射平面的光軸上。在理想情況下，照射平面的上面和下面是不會發(fā)出熒光的，意味著平面照射顯微鏡提供了內在光學掃描功能基于不產生非聚焦熒光的原理。這個思想起源于1903年，當時平面照射通過光散射成像來研究膠體溶液。直到最近熒光平面顯微鏡在生物成像中逐漸發(fā)展。目前有兩種平面照射顯微鏡，兩個都是寬場成像并有數字照相機，但照射的策略不同。在寬場照明策略中，照明光平面是靜止的并散布在整個視場。在線掃描照明策略中，光平面是通過側面小直徑光束的全視場掃描形成，在曝光過程中形成平面。在討論優(yōu)缺點時，重溫我們熟知的激光掃描顯微鏡中的點掃描照明策略，激光照射到樣品的上面并聚焦在一個點上，然后在二維平面?zhèn)认驋呙?。激光掃描顯微鏡中的信號探測用是采用單元素探測器，一般是光電二級管或血崩光電二級管。如此，激光掃描顯微鏡的象素大小，就是圖像上連續(xù)掃描點間的距離，可以選擇任意值。

藍色是激發(fā)光部分，綠色是采集光路。圖(e)到(f)就是Zeiss公司=商品化的SPIM的原理。